造血干細胞培養(yǎng)基化學成分明確,設計用于人體骨髓、臍帶血和脂肪組織等間充質(zhì)干細胞的zui大程度擴增。化學成分明確是由于它的成分既沒有化學合成,也沒有重組體生產(chǎn)。
造血干細胞培養(yǎng)基的組成及作用:
1、氨基酸
組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡。
必需氨基酸包括L-谷氨酰胺、L-組氨酸、L-異亮氨酸、L-亮氨酸、L-賴氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-蘇氨酸、L-色氨酸、L-纈氨酸等。
2、維生素
維持細胞生長的生物活性物質(zhì),在細胞代謝中起調(diào)節(jié)及控制作用。在細胞培養(yǎng)中,盡管血清是維生素重要來源,但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。
脂溶性維生素如:A、D、E、K。
水溶性維生素如:B1、B2、B6、B12、泛酸、葉酸、生物素、C、煙酰胺等。
許多維生素參與構成各種酶的活性基團的成分,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。
VA是細胞合成糖蛋白時寡糖基的載體,對上皮細胞有重要的維護作用。VD參與調(diào)節(jié)鈣的吸收。VE是抗氧劑,可防止組成生物膜的磷脂中不飽和脂肪酸被氧化。VK缺乏會引起低凝血酶原及凝血時間延長。
葉酸是合成四氫葉酸的重要原料,四氫葉酸在核酸的生物合成和蛋白質(zhì)的生物合成過程中起重要作用。
生物素是一些特異羧化酶的組成部分,參與糖代謝和脂肪酸的合成過程。
3、碳水化合物
碳水化合物是細胞生長主要能量來源,其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脫氧核糖、丙酮酸鈉和醋酸等。
4、無機離子
鈉、鉀、鎂、鈣、磷等基本的無機離子,這些都是細胞組成所必須并參與細胞的代謝。
培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外,通過提供鈉,鉀和鈣離子,幫助細胞調(diào)節(jié)細胞膜功能。培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素, 細胞通常可耐受260mOsm/kg ?320 mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意:向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì)。
Na+是細胞外液中zui主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細胞內(nèi)液,細胞內(nèi)K +的對于激活某些酶是必需的,它在調(diào)節(jié)細胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡也有極重要意義。Ca2+ 在細胞外液中的作用是將組織內(nèi)部細胞之間相互粘著,在細胞內(nèi)參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。Mg2+ 是構成細胞間質(zhì)的重要成分,對于細胞間相互穩(wěn)定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控的功用是十分廣泛而*。造血干細胞培養(yǎng)基