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細胞培養基pH值改變的原因及解決辦法
更新時間:2022-04-12 點擊次數:9239
pH值升高都有哪些原因?
①隨著培養基開蓋時間的增長,pH值會不斷升高;
---培養基中CO2揮發,導致溶液堿性升高。
②培養基存儲條件不合適;
③操作時間過長。
如何解決pH值升高的問題?
①*培養基盡量現配現用,2~8℃下保存一周內使用完;
②培養基在2~8℃下避光保存;
③避免操作時間過長。操作時間快速、減少同時進行的實驗數量。
pH值降低都有哪些原因?
①在細胞生長過程中,產生細胞代謝產物乳酸,乳酸蓄積,pH值通常會下降;
②培養瓶蓋擰得過緊;
---細胞代謝產生的CO2無法溢出,溶解于培養基中導致酸性變強。
③NaHCO3緩沖系統緩沖能力不夠;
④細菌、酵母或真菌污染等。
如何解決pH值降低的問題?
①及時傳代、提高傳代比例或降低血清量;
②適當松開瓶蓋;
③增加培養液中NaHCO3濃度或減少培養箱內CO2濃度(NaHCO3含量在2.0g/L到3.7g/L之間時,對應的CO2濃度為5~10%);
④若是微生物污染造成的,需及時丟棄培養基,并對操作、培養空間進行消毒處理。
在什么情況下選擇HEPES緩沖體系呢?
在開放式培養條件下(非5%CO2的培養環境),細胞代謝產生的CO2迅速溢出,pH迅速升高,使用HEPES緩沖液體系,可以防止培養基pH值迅速變動。