PEI 轉(zhuǎn)染試劑 現(xiàn)貨試用
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產(chǎn)品名稱:PEI Prime™ AQ 1 mg/mL Liquid Transfection Reagent
產(chǎn)品貨號(hào):Prime-AQ100-100ML
產(chǎn)品描述:PEI PrimeTM是一種高性能的轉(zhuǎn)染試劑,為大量,低成本和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)設(shè)計(jì)。PEI是常用的HEK293和CHO懸浮培養(yǎng)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。PEI PrimeTM是在哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)重組蛋白、抗體和病毒的試劑。PFI PrimeTM AQ是一種1mg /mL, ph調(diào)整和消毒過(guò)濾的溶液,含有純PEI PrimeTM。
陽(yáng)離子聚合物--聚乙烯亞胺(polyethyleminine,PEI)
聚乙烯亞胺是目前研究廣泛的陽(yáng)離子聚合物非病毒基因載體,它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物。PEI單體中每3個(gè)原子含1個(gè)氮,并構(gòu)成同的胺基。這些胺基的pKa值不同,使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強(qiáng)的結(jié)合DNA和黏附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。
分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素,高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,但因?yàn)槠浯罅空姾傻拇嬖谝约胺巧锝到庑?,可以?dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化,顯示出較大的細(xì)胞毒性,低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四種細(xì)胞上評(píng)價(jià)交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率。
不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同
枝狀的 800 kD PEI 是*報(bào)道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,枝狀的 25 kD PEI(25B)用于HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD、600 kD、800 kD 或線狀 22 kD PEI(22L)的高。
有研究報(bào)道,比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro,轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞,PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,PEI pro 的毒性*。經(jīng)過(guò)優(yōu)化,PEI-Max 的表達(dá)量?jī)?yōu)于 25 kD LPEI。
PEI 介導(dǎo)的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3(W/W),提高轉(zhuǎn)染試劑比例會(huì)提高轉(zhuǎn)染效率,但是隨之細(xì)胞毒性也會(huì)增加。另外轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會(huì)影響轉(zhuǎn)染效果。
陽(yáng)離子聚合物--脂質(zhì)體
陽(yáng)離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑,因而也廣泛用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染,但因其化學(xué)合成不易,商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價(jià)格較高,遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,因此只適合于小量瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。
目前常用的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽(yáng)離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細(xì)胞是非常適合進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,很容易接收外來(lái) DNA,在合適的轉(zhuǎn)染條件下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上, 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對(duì)較低,只有 40% ~ 60%。
Thermo Fisher 公司新開(kāi)發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升,但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價(jià)格較貴,不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大。
因此,目前PEI轉(zhuǎn)染試劑,價(jià)格實(shí)惠深受廣大科研伙伴的熱愛(ài)。重點(diǎn)是超級(jí)便宜!!!偷偷告訴你:據(jù)說(shuō)一次可配1L的量!1L??天啊,能用的完?如此便宜實(shí)惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢?
目前,小編給大家謀福利了,“免費(fèi)試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動(dòng)!
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