-
細胞凍存和復蘇細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”,這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多用二甲基亞砜(DMSO)作為保護劑,這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性;緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外,減少細胞內冰晶的形成,從而減少冰晶對細胞的物理損傷。復蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞外結晶在很短的時間內融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞凍存操作要點:1、細胞凍存前12~24h,換新鮮培養基,使細胞一直處于對數生長期。2、待細胞長至80%匯合...
2019 3-7
-
細胞凍存操作步驟操作步驟(一)細胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;2.取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作...
2019 3-4
-
PALL血清替代品供應商告訴你如何解凍血清從字面上我們不難看出PALL血清替代品是什么,PALL血清替代品就是一種代替血清的一款藥劑。那什么是血清呢?血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿,如何解凍血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。避免產生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-...
2019 2-20
-
細胞適應干細胞無血清培養基的方法眾所皆知干細胞無血清培養基的基本配方:基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產的細胞在體外培養時,多數呈貼壁生長或兼性貼壁生長;而當其在無血清、無蛋白培養基中生長時,由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長。1.直接適應——細胞從添加血清的培養基轉換到干細胞無血清培養基(SFM)中。一些類型細胞可直接從包含血清的培養基適應干細胞無血清培養基。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×...
2019 1-16
-
蛋白負染色試劑盒優缺比一比優缺比一比:1.蛋白負染色試劑盒缺點:需搭配黑底容器以便觀察優點:(1)特殊原理:負染原理,染劑只染膠體,不結合蛋白(2)快速染色:染色過程只需5分鐘,不需要醋酸固定(3)高靈敏度:超高染色靈敏度(4)實驗相容:染色過后可進行蛋白質轉漬或、電泳溶離、質譜儀蛋白質鑒定與轉譯后修飾分析。(5)安全可靠:染液不具毒性且可室溫儲存(6)方便觀察:肉眼可見影像,不須熒光2.SYPRORuby優點:靈敏度高缺點:(1)操作過程需要全程避光(2)須長時間過夜染色(3)操作過程需搭配有機溶劑...
2019 1-16
-
低速離心機使用注意事項低速離心機使用注意事項1.低速離心機轉頭應固定在準確位置,固定螺絲應擰緊,轉頭等配件是否有裂縫及腐蝕,地線接觸情況。2.低速離心機必須使用獨立的插座,保證電壓穩定;如用戶電壓不穩定,必須連接穩壓電源,以免損壞離心機;臺式低速離心機要放在結實、穩固、水平的臺面上,機箱周圍留有一定空間,保持通風良好。3.低速離心機每次使用完后,應打開蓋子,擦去冷凝水,然后自然晾干;離心前后,轉頭必須輕輕垂直放下或提起,避免碰撞轉軸和轉頭。4.離心機轉頭,吊籃,套管等,使用完畢后,應擦干,并分別放...
2019 1-14
-
你知道干細胞無血清培養基的優缺點么?干細胞無血清培養基和試劑被廣泛的應用于培養哺乳動物和無脊動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數的無血清產品含有向細胞內轉運離子的轉鐵蛋白和調節葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質如清蛋白,纖連蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養中發揮各種不同功能,如吸附毒性化合物,抗生物反應器剪切力,提供細胞貼壁所需的基質,作為脂類和其他生長因子的載體等。在我們使用干細胞無血清培養基中也是分為優缺點的,下面小編就給大家講一講吧干細胞無血清培養基的優點1.可避免血清批次間的質量...
2019 1-7
-
細胞培養新技術——中空纖維細胞培養系統細胞培養新技術——中空纖維細胞培養系統為了讓細胞培養更簡單、更經濟、更,美國FiberCellSystems公司十余年來一直致力于中空纖維細胞培養系統的開發。如今,這種與眾不同的培養系統已經上市了。FiberCell中空纖維細胞培養系統模擬了生物體循環系統中毛纖維的結構及功能,將天然親水聚合物,拉成兩端有開口的纖維。將此種中空纖維裝入柱狀的塑膠容器中,其成品就像光纖排列在電纜中一樣。它利用中空纖維膜隔離細胞與細胞培養基,在中空纖維的外壁培養細胞。空纖維是一種很小的、圓柱形的透...
2019 1-7